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金黃色葡萄球菌的檢驗方法

文章作者:www.utbltn.icu發布時間:2020-01-03瀏覽次數:1801

金黃色葡萄球菌試驗方法步驟

1.濃縮培養方法

(1)樣品處理:無菌取出25g(ml)樣品,加入225mL無菌生理鹽水,將固體樣品研磨或置于均化器中以制備懸浮液。

(2)富集和分離培養:移取5ml上述懸浮液,接種于50mL 7.5%氯化鈉肉湯或胰大豆肉湯培養基中,于36℃在1℃下孵育1小時,轉移至血液板上。將Baird-Parker板在36℃下在24℃下培養1小時。挑選血板上的金黃色(有時是白色)菌落用于革蘭氏染色顯微鏡檢查和血漿凝固酶試驗。

(3)形態學:細菌為革蘭氏陽性球菌,排列成葡萄狀,無孢子,無膠囊,病原性葡萄球菌細小,直徑約0.5um至1um。

(4)它在肉湯中生長渾濁,有時液體在胰痰和大豆肉湯中澄清。當細菌數量很大時,它會變得混濁。血板上的菌落為金黃色,有時為白色,大而突出,圓形,不透明,表面光滑,周圍有溶血圈。在Baird-Parker板上,它是圓形,光滑,潮濕,直徑為2mm 3mm,顏色為灰色至黑色,顏色淺,外層為渾濁帶和透明環。接觸針接觸菌落似乎有奶油膠的硬度,偶爾遇到類似不溶脂的菌落;但沒有渾濁的腰帶和透明的地圖。在長期保存的冷凍或干燥食品中分離的菌落比典型菌落產生的黑色輕,并且外觀可能粗糙和干燥。

(5)血漿凝固酶試驗:將0.5 mL新鮮兔血漿移入小試管中,加入0.5 mL金黃色葡萄球菌肉浸液,孵育0.5 h。搖勻并搖晃。在36°C 1°C的培養箱或水浴中,每半小時觀察一次,觀察6h,如果有凝固,即當試管傾斜或倒置時,凝塊存在并被認為是陽性結果。同時,使用已知的陽性和陰性葡萄球菌菌株和肉湯作為對照。

2,直接計數法6.2.1取上述1:10懸浮液,稀釋10倍,根據樣品污染情況,選擇1mL不同濃度的稀釋劑,分別加入3個Baird-Parker板,每個板的接種量為0.3分別為mL,0.3mL和0.4mL,然后用滅菌的L棒涂覆整個板。如果水不易吸收,可將板放置在36°C±1°C lh,水蒸發,板在36°C±1°C倒置。

選擇在三個平板周圍具有濁帶的黑色菌落,從中選擇5個菌落,分別接種血液平板。將細胞在36℃下培養1小時,持續24小時,然后進行染色顯微鏡檢查和血漿凝固酶試驗。法。

3,菌落計數:在三個平板中懷疑金黃色葡萄球菌黑色菌落的數量,乘以血漿凝固酶陽性數,除以5,再乘以稀釋因子,即可找到每克金黃色葡萄樣品數量球菌。

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